关于引物RT cDn的疑问标题，引物RT cDn，作用机制与实际应用如何？

RT-cDNA

RT-cDNA（Reverse Transcription cDNA）即逆转录cDNA，是通过逆转录酶的作用，以RNA或mRNA为模板合成的第一条链cDNA，这一过程是RT-PCR（逆转录聚合酶链式反应）技术中的关键步骤之一，在RT-PCR中，首先提取细胞或组织中的总RNA或mRNA，然后利用逆转录酶和引物从RNA合成第一链cDNA，再通过PCR扩增合成目的片段。

引物

在RT-cDNA合成过程中，常用的引物有以下几种：

1、随机引物：由多个任意碱基连接而成的一套寡聚引物组，常见的有random（6）、random（9）、random（10）等，随机引物可以结合到mRNA上的多个位点，因此适用于长片段mRNA的5′-末端序列获取及带有二级结构区域或逆转录终止位点的模板RNA的反转录反应，由于其特异性较低，合成的cDNA产物复杂程度较高，可能会降低后续PCR反应的敏感度和特异性。

2、Oligo(dT)引物：是针对真核生物具有Poly(A)尾的mRNA设计的引物，一般由12-18个胸腺嘧啶（T）组成，由于Poly(A+)RNA仅占总RNA的1%-4%，因此使用Oligo(dT)引物合成的cDNA数量和复杂度相对较低，这种引物特异性较高，但要求RNA样品具有完整的Poly(A)尾，且对于较长的mRNA可能无法完全延伸到5’端。

3、特异性引物：是根据目标RNA的已知序列设计的引物，具有较高的特异性，使用特异性引物可以消除RT-PCR时基因组DNA污染对结果的影响，并产生更为特异的PCR扩增，特异性引物的设计需要事先知道目标RNA的序列信息。

RT-cDNA及其引物在分子生物学研究中具有重要意义，在选择引物时，需要根据实验目的、样品类型和研究需求等因素进行综合考虑和选择。